活细胞中蛋白质相互作用网络鉴定：邻近象征

技术平台

以TurboID技术平台为例，，，，，，，，该技术平台在主张蛋白结尾融合了突变型生物素衔接酶。。。。。。。。在过表白细胞中，，，，，，，，参与生物素刺激，，，，，，，，在10min之内，，，，，，，，即可迅速对主张蛋白的相互作用蛋白进行生物素化象征。。。。。。。。这一象征过程不仅速度快，，，，，，，，布景低，，，，，，，，甚至在室温前提下也能顺利进行。。。。。。。。因而，，，，，，，，TurboID技术平台极大地拓展了其利用领域，，，，，，，，不仅合用于哺乳动物细胞系统，，，，，，，，还可利用于植物、虫豸等多种生物系统。。。。。。。。随后，，，，，，，，通过度离富集生物素象征的蛋白质并进行酶切处置，，，，，，，，能够轻松获得肽段样品，，，，，，，，进而用于质谱分析，，，，，，，，从而深刻钻研蛋白质的相互作用及其职能。。。。。。。。

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平台特点

√活细胞原位捕获瞬时/弱互作，，，，，，，，预防 APEX 类酶需 H2O2引发的细胞毒性。。。。。。。。

√象征功夫仅需 10 分钟（传统 BioID 需 18～24 幼时），，，，，，，，且可在室温（25°C）下高效工作。。。。。。。。合用于捕获瞬时/弱相互作用及低丰度蛋白，，，，，，，，高活络度。。。。。。。。

√提供高分辨率空间信息，，，，，，，，揭示复杂生物过程。。。。。。。。

案例展示

项目简介：分析给药处置前后，，，，，，，，细胞中与主张蛋白（POI）相互作用蛋白组的变动。。。。。。。。

数据展示：利用邻近象征战术，，，，，，，，构建POI-TurboID表白载体，，，，，，，，在细胞中过表白，，，，，，，，别离设置给药组与空缺组，，，，，，，，生物素化象征。。。。。。。。将细胞中蛋白组进行富集后，，，，，，，，定性与定量分析生物素化蛋白的差距，，，，，，，，以表征POI相互作用蛋白组的变动。。。。。。。。

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有关文件

※对细胞内蛋白质丰度、活性、相互作用和成药性进行多沉分析，，，，，，，，成功利用于约 1,600 个 BRaf 蛋白变体的多维度生化分析，，，，，，，，揭示了癌症有关突变对蛋白职能调控的机造差距。。。。。。。。Multiplexed profiling of intracellular protein abundance, activity, interactions and druggability with LABEL-seq.Nat Methods. 2024 Nov;21(11):2094-2106.(IF: 36.1)

※开发新型邻近象征技术，，，，，，，，解决了传统光催化象征的痛点，，，，，，，，实现了精准、低布景的活体兼容空间蛋白质分析。。。。。。。。Precise and In Vivo-Compatible Spatial Proteomics via Bioluminescence-Triggered Photocatalytic Proximity Labeling. ACS Cent. Sci. doi: 10.1021/acscentsci.5c00520.(IF: 13.1)

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蛋白蛋白相互作用Protein-protein interaction

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